根据解剖病历变化可以做出初步判断,进一步诊断需要做实验室诊断。根据流行病学资料、临床症状及病理变化各方面综合诊断。如有典型胸腔病变,则结合流行病学资料及临床症状常可做出初步诊断。确诊有赖于血清学检查和细菌学检查。本病常用的血清学检查方法为补体结合试验,也可应用凝集反应试验,此法操作较简便,但因凝集素在病牛体内持续时间短,故其准确性不如补体结合试验。在本病疫区,也有应用间接血凝试验、玻片凝集试验作为辅助诊断之用。细菌学检查时,取肺组织、胸腔渗出液及淋巴结等接种于10%马血清马丁肉汤及马丁琼脂,37℃培养2~7d,如有生长,即可进行支原体的鉴定。本病应与牛巴氏杆菌病、牛肺结核病等进行区别诊断。病牛高热稽留,呼吸困难,发出“吭”声,腹式呼吸,叩胸有水平浊音,听诊有支气管呼吸音、啰音和摩擦音,前胸和肉垂水肿。通过以上症状可以做出诊断。根据临床症状,流行病学及实验室诊断进行确诊。